, Karim BOUZAKRI (1) Sophie ROME (2)
(1) Umr Diathec 7294, Centre Européen D'étude Du Diabète (ceed), Université De Strasbourg, Ecole Doctorale 414, Strasbourg, France, Strasbourg, France, (2) Umr Inserm 1060/inra 1397, Laboratoire Carmen, Hôpital Lyon-Sud, Université Lyon 1, Pierre-Bénite, France, Lyon, France
Introduction
La transplantation des îlots pancréatiques vise à restaurer un contrôle glycémique chez les patients diabétiques de type 1. Cependant, une partie des îlots greffés sont détruits en partie à cause d’une réponse inflammatoire et pro-coagulante précoce (IBMIR) induite lors de la procédure de transplantation. Dans le but d’améliorer la survie et la fonction des îlots, notre étude s'intéresse à la fonction des vésicules extracellulaires (EVs) libérées par les îlots en phase de culture pré-transplantation sur les monocytes, afin d’évaluer le rôle des EVs d'îlots dans la réponse immunitaire.
Méthodes
Des îlots pancréatiques humains ont été cultivés dans un milieu physiologique dépourvu d’EVs (Contrôle) ou dans un milieu pro-inflammatoire (Cytomix). Les EVs des surnageants de culture ont été extraites puis caractérisées par microscopie électronique à transmission, western blot et analyse de distribution de taille par DLS. Des monocytes humains THP-1 ont été traités trois jours consécutifs avec 3 µg/ml d’EVs. Trois jours post traitement, l’expression de cytokines a été quantifiée par RT-qPCR, et l’adhérence ainsi que la polarisation des monocytes ont été déterminées par microscopie à fluorescence avec marquage CD86/CD163 et coloration au DAPI.
Résultats
La microscopie a révélé une prolifération plus importante des monocytes traités avec les EVs-Cytomix par rapport aux EVs-Contrôle. Les analyses par RT-qPCR montrent une diminution significative du TNF-alpha et TGF1-bêta pour les cellules traitées par les EVs-Contrôle, une adhérence accrue et un marquage positif CD86/CD163, suggérant un début de différenciation en macrophages. À l’inverse, les EVs-Cytomix semblent maintenir la survie et la prolifération des monocytes.
Conclusion
Notre étude démontre que les EVs dérivées d’îlots influencent différemment la survie et la différenciation des monocytes selon leur environnement pro-inflammatoire. Une analyse de la réponse transcriptomique des monocytes receveurs par RNA-seq est en cours pour approfondir les mécanismes moléculaires impliqués.
Les auteurs déclarent ne pas avoir d'intérêt direct ou indirect (financier ou en nature) avec un organisme privé, industriel ou commercial en relation avec le sujet présenté.